Von Gewebe abgeleitete Fraktionen, die üblicherweise in Hepatozyten-, S9- und In-vitro-Tests verwendet werden
Hier ist ein Memo über die Eigenschaften und Unterschiede von aus Lebergewebe stammenden Komponenten, die in In-vitro-Studien zur Pharmakokinetik und zur Erforschung des Arzneimittelstoffwechsels weit verbreitet sind.
Hepatozyten
Hepatozyten, die aus einer Suspension (Leberhomogenat, leberfreie Zellen) isoliert wurden, die durch Zerkleinern und Homogenisieren der Leber erhalten wurde.
Da Hepatozyten so wie sie sind erhalten bleiben, sind sie in vivo relativ nahe. Die Reproduzierbarkeit der Konjugationsreaktion, die mit S9- und Mikrosomenfraktionen schwierig durchzuführen ist, ist ebenfalls gut.Es kann zur Aufnahme über Transporter, Arzneimittel-Wechselwirkungen und zur Bewertung der CYP-Enzyminduktion verwendet werden.Andererseits ist es notwendig, die Überlebensrate während der Kryokonservierung und des Auftauens zu berücksichtigen.
S9-Fraktion
Als Bild wird eine Fraktion, die Stoffwechselenzyme enthält, aus Hepatozyten extrahiert.
Der durch Zentrifugieren des Leberhomogenats erhaltene Überstand (Überstand) entfernt Zellmembranen, Kerne und Mitochondrien.Es enthält viele Enzyme, die am Arzneimittelstoffwechsel beteiligt sind, wie die folgenden.
Cytochrom P450 (CYP), Flavin-haltige Monooxygenase (FMO), Carboxyesterase (CES), Epoxidhydrolase (EH), UDP-Glucuronosyltransferase (UGT), Sulfattransferase (SULT), Glutathion-S-Transferase (GST), Methyltransferase, Acetyltransferase, usw.
Lebermikrosomen
Niederschlag, wenn S9 weiter zentrifugiert wird.Beinhaltet endoplasmatische Retikulumfragmente (während der Zentrifugation zerrissen) und Lysosomen.
Eine der Organellen.Es hat eine Struktur mit einem retikulierten Film.
Es hat wichtige Funktionen im Zucker / Lipid-Stoffwechsel und in der Steroid / Protein-Synthese.
Cytochrom P450 und Oxygenase sind in einem Film lokalisiert.
Ein Vesikel, das aus einer einzelnen Membranschicht besteht.
Enthält Hydrolasen wie Glycosidasen und Peptidasen.
Wichtig für Fremdstoffe in Zellen und Autolyse.
Da viele Arzneimittel und Fremdstoffe durch CYP metabolisiert und entgiftet werden, wird in Experimenten häufig die "Mikrosomenfraktion, die ein einfaches System einschließlich CYP ist" verwendet (obwohl in den letzten Jahren auch ein anderer Metabolismus als CYP wichtig ist).Es ist aus Gründen wie Stabilität gegen Kryokonservierung, Reproduzierbarkeit und reichlich vorhandenen kommerziellen Produkten einfach zu verwenden.
CYP, UGT, CES usw.
Cytosol
Überstand, wenn S9 weiter zentrifugiert wird
GST, SULT usw.