Fraksi turunan jaringan yang biasa digunakan dalam tes in vitro seperti hepatosit dan S9

2018 12 年月日 212019 5 年月日 11

Saya akan menuliskan catatan tentang karakteristik dan perbedaan bahan-bahan yang berasal dari jaringan hati yang biasa digunakan dalam studi in-vitro untuk studi farmakokinetik dan metabolisme obat.

Daftar isi

1. hepatosit
2. Fraksi S9
3. mikrosom hati
4. sitosol

hepatosit

Hepatosit diisolasi dari suspensi hati yang dihomogenisasi (homogenat hati, sel hati bebas).

Relatif dekat dengan in-vivo karena hepatosit tetap utuh. Reproduktifitas reaksi konjugasi, yang sulit dilanjutkan dengan S9 atau fraksi mikrosomal, juga baik.Ini dapat digunakan untuk mengevaluasi penyerapan yang dimediasi transporter, interaksi obat-obat, dan induksi enzim CYP.Di sisi lain, perlu memperhatikan tingkat kelangsungan hidup selama kriopreservasi dan pencairan.

Fraksi S9

Sebagai gambaran, fraksi yang mengandung enzim metabolik diekstraksi dari hepatosit.

Supernatan (supernatan) diperoleh dengan sentrifugasi homogenat hati, dari mana membran sel, nukleus, mitokondria, dll telah dihilangkan.Ini mengandung banyak kelompok enzim yang terlibat dalam metabolisme obat, seperti:

sitokrom P450 (CYP), monooxygenase (FMO) yang mengandung flavin, carboxyesterase (CES), epoksida hidrolase (EH), UDP glucuronyltransferase (UGT), sulfotransferase (SULT), glutathione-S-transferase (GST), methyltransferase, acetyltransferase, dll .

mikrosom hati

Curah hujan pada sentrifugasi lebih lanjut dari S9.Termasuk fragmen retikulum endoplasma (sobek selama sentrifugasi) dan lisosom.

sel retikulum endoplasma
salah satu organel.Ini memiliki struktur dengan membran jaring.
Ini memiliki fungsi penting dalam metabolisme gula / lipid dan sintesis steroid / protein.
Sitokrom P450, oksigenase, dll terlokalisasi di membran.

Lisosom
Sebuah vesikel yang terdiri dari satu lapisan membran.
Mengandung hidrolase seperti glikosidase dan peptidase.
Penting untuk benda asing intraseluler dan autodigesti.

Karena banyak obat dan zat asing dimetabolisme dan didetoksifikasi oleh CYP, `` fraksi mikrosom, yang merupakan sistem sederhana yang mengandung CYP, '' banyak digunakan dalam percobaan (walaupun metabolisme selain CYP juga penting dalam beberapa tahun terakhir).Mudah digunakan karena alasan seperti stabilitas terhadap kriopreservasi, reproduktifitas, dan berbagai macam produk yang tersedia secara komersial.

CYP, UGT, CES, dll.