Fractions d'origine tissulaire couramment utilisées dans les hépatocytes, S9 et tests in vitro
Voici un mémo sur les caractéristiques et les différences des composants dérivés des tissus hépatiques qui sont largement utilisés dans les études in vitro de pharmacocinétique et de recherche sur le métabolisme des médicaments.
hépatocyte
Hépatocytes isolés à partir d'une suspension (homogénat hépatique, cellules hépatiques libres) obtenue par broyage et homogénéisation du foie.
Les hépatocytes étant conservés tels quels, ils sont relativement proches de ceux in vivo. La reproductibilité de la réaction de conjugaison, qui est difficile à réaliser avec les fractions S9 et microsome, est également bonne.Il peut être utilisé pour l'absorption via les transporteurs, les interactions médicamenteuses et l'évaluation de l'induction enzymatique du CYP.En revanche, il faut faire attention au taux de survie lors de la cryoconservation et de la décongélation.
Fraction S9
A titre d'image, une fraction contenant des enzymes métaboliques est extraite des hépatocytes.
Le surnageant (surnageant) obtenu par centrifugation de l'homogénat hépatique élimine les membranes cellulaires, les noyaux et les mitochondries.Il contient de nombreuses enzymes impliquées dans le métabolisme des médicaments, telles que les suivantes.
Cytochrome P450 (CYP), monooxygénase contenant de la flavine (FMO), carboxyestérase (CES), époxyde hydrolase (EH), UDP glucuronosyltransférase (UGT), sulfate transférase (SULT), glutathion-S-transférase (GST), méthyltransférase, acétyltransférase, etc.
Microsomes hépatiques
Précipitation lorsque S9 est encore centrifugé.Comprend des fragments de réticulum endoplasmique (déchirés lors de la centrifugation) et des lysosomes.
L'un des organites.Il a une structure avec un film réticulé.
Il a des fonctions importantes dans le métabolisme des sucres / lipides et dans la synthèse des stéroïdes / protéines.
Le cytochrome P450 et l'oxygénase sont localisés dans un film.
Une vésicule constituée d'une seule couche de membrane.
Contient des hydrolases telles que des glycosidases et des peptidases.
Important pour les substances étrangères dans les cellules et l'autolyse.
Étant donné que de nombreux médicaments et substances étrangères sont métabolisés et détoxifiés par le CYP, la "fraction microsome, qui est un système simple comprenant le CYP" est largement utilisée dans les expériences (bien que le métabolisme autre que le CYP soit également important ces dernières années).Il est facile à utiliser pour des raisons telles que la stabilité contre la cryoconservation, la reproductibilité et l'abondance de produits commerciaux.
CYP, UGT, CES, etc.
Le cytosol
Surnageant lorsque S9 est encore centrifugé
TPS, SULT, etc.