hepatocyteとかS9とかvitro試験で汎用される組織由来画分

2018年12月21日2019年5月11日

薬物動態・薬物代謝研究のin-vitro試験で汎用される肝組織由来成分について、それぞれの特徴や違いに関したメモを記します。

hepatocyte（へパトサイト、肝細胞）

肝臓を破砕し均一にした懸濁液（肝ホモジネート、肝遊離細胞）から、肝細胞を単離したもの。

肝細胞がそのままの状態で保持されているため、比較的in-vivoに近い。S9やミクロソーム画分では進行しにくいような抱合反応の再現性もよい。トランスポーター経由の取り込みや薬物間相互作用、CYP酵素誘導の評価に活用できる。一方で、凍結保存や解凍時の生存率に注意が必要。

S9画分

イメージとしては、肝細胞から代謝酵素をふくむ画分を抜き出したもの。

肝ホモジネートを遠心分離した上清（上澄み液）で、細胞膜や核、ミトコンドリアなどが取り除かれている。以下のような薬物代謝にかかわる多く酵素群を含む。

シトクロムP450（CYP）, フラビン含有モノオキシゲナーゼ（FMO）, カルボキシエステラーゼ（CES）, epoxide hydrolase（EH）, UDP グルクロン酸転移酵素（UGT）,硫酸転移酵素（SULT）、グルタチオン-S-トランスフェラーゼ（GST）, methyltransferase, acetyltransferaseなど

肝ミクロソーム

S9をさらに遠心分離したときの沈殿。小胞体断片（遠心分離の際にちぎれる）やリソソームが含まれる。

多くの薬物や異物がCYPによって代謝・解毒されるため、「CYPをふくむ単純な系であるミクロソーム画分」が実験に汎用されている（近年はCYP以外の代謝も重要ではあるが）。凍結保存に対する安定性、再現性、市販品の充実などの理由からも利用しやすい。

CYP，UGT，CESなど

サイトゾル

S9をさらに遠心分離したときの上清

GST，SULTなど