Тканевые фракции, обычно используемые в гепатоцитах, тестах S9 и in vitro.
Вот памятка о характеристиках и различиях компонентов ткани печени, которые широко используются в исследованиях фармакокинетики и метаболизма лекарств in vitro.
гепатоцит
Гепатоциты, выделенные из суспензии (гомогенат печени, свободные клетки печени), полученной измельчением и гомогенизацией печени.
Поскольку гепатоциты сохраняются как есть, они относительно близки к in vivo. Воспроизводимость реакции конъюгации, которая трудно протекает с фракциями S9 и микросомами, также хорошая.Его можно использовать для поглощения через переносчики, лекарственного взаимодействия и оценки индукции фермента CYP.С другой стороны, необходимо обращать внимание на выживаемость при криоконсервации и оттаивании.
S9 фракция
Как изображение, фракция, содержащая метаболические ферменты, извлекается из гепатоцитов.
Супернатант (супернатант), полученный центрифугированием гомогената печени, удаляет клеточные мембраны, ядра и митохондрии.Он содержит множество ферментов, участвующих в метаболизме лекарств, таких как следующие.
Цитохром P450 (CYP), флавинсодержащая монооксигеназа (FMO), карбоксиэстераза (CES), эпоксидгидролаза (EH), UDP-глюкуронозилтрансфераза (UGT), сульфаттрансфераза (SULT), глутатион-S-трансфераза (GST), метразэтилтрансфераза, ацетилтрансфераза и т.п.
Микросомы печени
Осаждение при дальнейшем центрифугировании S9.Включает фрагменты эндоплазматического ретикулума (разорванные при центрифугировании) и лизосомы.
Одна из органелл.Имеет структуру с сетчатой пленкой.
Он выполняет важные функции в метаболизме сахара / липидов и синтезе стероидов / белка.
Цитохром Р450 и оксигеназа локализованы в пленке.
Везикула, состоящая из одного слоя мембраны.
Содержит гидролазы, такие как гликозидазы и пептидазы.
Важен для посторонних веществ в клетках и автолиза.
Поскольку многие лекарства и чужеродные вещества метаболизируются и детоксифицируются с помощью CYP, в экспериментах широко используется «микросомная фракция, которая представляет собой простую систему, включающую CYP» (хотя в последние годы также важен метаболизм, отличный от CYP).Его легко использовать по таким причинам, как устойчивость к криоконсервации, воспроизводимость и наличие большого количества коммерческих продуктов.
CYP, UGT, CES и т. Д.
Цитозоль
Супернатант при дальнейшем центрифугировании S9
GST, SULT и т. Д.