เศษส่วนที่ได้มาจากเนื้อเยื่อที่ใช้กันทั่วไปในการทดสอบในหลอดทดลอง เช่น เซลล์ตับและ S9

2018 12 年月日 212019 5 年月日 11

ฉันจะจดบันทึกเกี่ยวกับลักษณะและความแตกต่างของส่วนผสมที่ได้จากเนื้อเยื่อตับซึ่งมักใช้ในการศึกษาในหลอดทดลองสำหรับการศึกษาเภสัชจลนศาสตร์และเมแทบอลิซึมของยา

เซลล์ตับ

เซลล์ตับถูกแยกออกจากสารแขวนลอยที่เป็นเนื้อเดียวกันของตับ (ตับที่เป็นเนื้อเดียวกัน, เซลล์ตับอิสระ)

ค่อนข้างใกล้เคียงกับ in-vivo เนื่องจาก hepatocytes ยังคงอยู่เหมือนเดิม ความสามารถในการทำซ้ำของปฏิกิริยาการผันคำกริยาซึ่งยากต่อการดำเนินการกับ S9 หรือเศษส่วนไมโครโซมก็ดีเช่นกันสามารถใช้ในการประเมินการดูดซึมโดยสื่อกลางระหว่างการขนส่ง ปฏิกิริยาระหว่างยากับยา และการเหนี่ยวนำเอนไซม์ CYPในทางกลับกัน จำเป็นต้องให้ความสนใจกับอัตราการรอดชีวิตระหว่างการเก็บรักษาด้วยการแช่แข็งและการละลาย

เศษส่วน S9

จากภาพ เศษส่วนที่มีเอนไซม์เมตาบอลิซึมถูกสกัดออกจากเซลล์ตับ

ส่วนเหนือตะกอน (supernatant) ที่ได้จากการปั่นแยกตับให้เป็นเนื้อเดียวกัน ซึ่งเยื่อหุ้มเซลล์ นิวเคลียส ไมโทคอนเดรีย ฯลฯ ถูกกำจัดออกไปแล้วประกอบด้วยกลุ่มเอนไซม์หลายกลุ่มที่เกี่ยวข้องกับเมแทบอลิซึมของยา เช่น:

ไซโตโครม P450 (CYP), โมโนออกซีจีเนสที่มีฟลาวิน (FMO), คาร์บอกซีเอสเทอเรส (CES), อีพอกไซด์ไฮโดรเลส (EH), UDP กลูคูโรนิลทรานสเฟอเรส (UGT), ซัลโฟทรานสเฟอเรส (SULT), กลูตาไธโอน-เอส-ทรานสเฟอเรส (GST), เมทิลทรานสเฟอเรส, อะซิติลทรานสเฟอเรส ฯลฯ .

ไมโครโซมของตับ

ปริมาณน้ำฝนจากการปั่นแยกเพิ่มเติมของ S9รวมชิ้นส่วนเอนโดพลาสมิกเรติคูลัม (ฉีกออกระหว่างการหมุนเหวี่ยง) และไลโซโซม

เนื่องจากยาและสารแปลกปลอมจำนวนมากถูกเมแทบอลิซึมและล้างพิษโดย CYPs "เศษส่วนไมโครโซมซึ่งเป็นระบบง่ายๆ ที่มี CYPs" จึงถูกนำมาใช้กันอย่างแพร่หลายในการทดลอง (แม้ว่าเมแทบอลิซึมอื่นที่ไม่ใช่ CYPs ก็มีความสำคัญเช่นกันในช่วงไม่กี่ปีที่ผ่านมา)ใช้งานง่ายด้วยเหตุผลต่างๆ เช่น ความเสถียรต่อการเก็บรักษาด้วยการแช่แข็ง ความสามารถในการทำซ้ำ และผลิตภัณฑ์ที่มีจำหน่ายทั่วไปมากมาย

CYP, UGT, CES เป็นต้น

ไซโตซอล

ส่วนเกินจากการปั่นแยกเพิ่มเติมของ S9

GST, SULT เป็นต้น